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概述
?小動(dòng)物活體成像技術(shù)因具有直接觀測(cè)、可同時(shí)觀測(cè)多個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，對(duì)同一個(gè)研究個(gè)體可進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間反復(fù)跟蹤成像又不需殺死動(dòng)物等優(yōu)點(diǎn)，故被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域。目前，小動(dòng)物活體成像主要采用生物發(fā)光和熒光兩種技術(shù)。
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原理
生物發(fā)光通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將熒光素酶基因標(biāo)記受體細(xì)胞或DNA，利用其產(chǎn)生的蛋白酶與相應(yīng)的底物發(fā)生生化反應(yīng)，在生物體內(nèi)產(chǎn)生光信號(hào)(自發(fā)光，其信號(hào)的發(fā)射不需要外部光源激發(fā))。
熒光技術(shù)采用熒光報(bào)告基因( GFP、RFP)或熒光染料進(jìn)行標(biāo)記，利用報(bào)告基因產(chǎn)生熒光蛋白或染料產(chǎn)生的熒光，在生物體內(nèi)形成光源(需要外部能量激發(fā))。
（熒光技術(shù)原理）
名稱 | 優(yōu)點(diǎn) | 缺點(diǎn) |
生物發(fā)光 | ||
熒光技術(shù) | ①高靈敏度;②標(biāo)記物選擇多，標(biāo)記方式更靈活;③方便、成本低。 | ①相對(duì)低空間分辨率;②熒光染料可能有毒性。 |
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應(yīng)用
舉例：
1.不同治療方案對(duì)小鼠結(jié)腸癌腹腔轉(zhuǎn)移模型的效果比較
2.皮膚移植（干細(xì)胞治療）領(lǐng)域的應(yīng)用
（表皮移植4天后，IVScope 8500成像，曝光時(shí)間5min）
3.肺腫瘤研究領(lǐng)域的應(yīng)用
4周齡雌性Nod/Scid免疫缺陷小鼠，尾靜脈注射A549肺癌細(xì)胞，5周后用IVScope 8200系統(tǒng)檢測(cè)，檢測(cè)前10min腹腔注射底物熒光素，并注射4%水合氯醛麻醉。
4.不同部位腫瘤模型鑒定
5.熒光標(biāo)記物示蹤（Ex735/Em810熒光通道）
DiR染料標(biāo)記293細(xì)胞，尾靜脈注射后拍攝（左右二列間隔半小時(shí)拍攝；第一行均為對(duì)照組，第二行均為實(shí)驗(yàn)組）
實(shí)驗(yàn)組解剖后拍攝（肝臟、肺、脾臟有明顯信號(hào)）
6.視神經(jīng)損傷模型鑒定
7.腫瘤模型構(gòu)建（生物發(fā)光）
8.腦膠質(zhì)瘤模型的鑒定
勤翔小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)
IVScope8000系列小動(dòng)物活體成像系統(tǒng),是上海勤翔推出的高靈敏度、多功能活體成像系統(tǒng)。它采用一級(jí)背部感光薄化超低溫CCD相機(jī)、搭配特殊設(shè)計(jì)的暗箱、自動(dòng)加熱樣品臺(tái)及專業(yè)的圖像處理軟件等，能滿足客戶的多種實(shí)驗(yàn)需求。
硬件特色
①可選配薄化背照式制冷CCD相機(jī)，量子效率至高可達(dá)95%；
②CCD相機(jī)至低制冷溫度可達(dá)-100℃；
③F0.8超大光圈，保障足夠進(jìn)光量，保障微弱信號(hào)也能捕捉到；
④隔絕外界光線的封閉暗箱設(shè)計(jì)，在正常實(shí)驗(yàn)室光照條件下即可成像；
⑤6組熒光光源和濾光片組合可供選擇，至多能夠同時(shí)裝載5組。觀測(cè)范圍涵蓋了紫外、可見光及近紅外波段，使得市面上幾乎所有的熒光染料都可以使用。
⑥電動(dòng)升降樣品臺(tái)，3檔位置可調(diào)，滿足不同視野大小的成像要求。至多可以同時(shí)滿足5只小鼠的成像需求；
⑦樣品臺(tái)具有恒溫加熱功能，至大程度保障所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)是在小動(dòng)物的正常生理狀態(tài)下測(cè)得；
⑧可選配氣體麻醉系統(tǒng)，方便實(shí)驗(yàn)操作；
⑨支持外接980nm/808nm激光器，搭配鵝頸管支架，滿足用戶對(duì)于上轉(zhuǎn)換熒光實(shí)驗(yàn)的需求。
軟件特色
（小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)軟件界面）
①實(shí)時(shí)監(jiān)控：可通過(guò)預(yù)覽功能在軟件窗口對(duì)樣品進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)；
②圖像連續(xù)采集：通過(guò)軟件設(shè)置曝光時(shí)間和連續(xù)幀數(shù)，連續(xù)拍攝一組圖像而不會(huì)錯(cuò)過(guò)短暫熒光或生物發(fā)光信號(hào)，拍攝結(jié)果自動(dòng)保存；
③圖像編輯：具有圖像的旋轉(zhuǎn)、裁剪、反色等處理功能，進(jìn)行圖像優(yōu)化處理；
④偽彩疊加：調(diào)色板色彩豐富，讓用戶可根據(jù)自己的使用習(xí)慣疊加偽彩，從而大大增加肉眼對(duì)灰階圖像的視覺分辨能力；
⑤軟件算法強(qiáng)大：可對(duì)ROI區(qū)域進(jìn)行分析，并具有圖像批處理功能；
⑥預(yù)置拍攝參數(shù)：自動(dòng)保存及讀取拍攝參數(shù)，避免拍攝時(shí)重復(fù)設(shè)置參數(shù)；
⑦ 模塊控制功能：可通過(guò)電腦實(shí)現(xiàn)對(duì)系統(tǒng)每個(gè)模塊的控制，包括對(duì)升降臺(tái)、熒光系統(tǒng)和濾鏡輪的控制；
⑧支持以動(dòng)態(tài)視頻形式輸出實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
助力科研-IVScope客戶應(yīng)用論文
1.Near-Infrared Light-Controlled and Real-Time Detection of Osteogenic Differentiation in Mesenchymal Stem Cells by Upconversion Nanoparticles for
Osteoporosis Therapy.doi. org/10.1021/acsnano.2c02900
2.Near-Infrared Light-Controlled Activation of Adhesive Peptides Regulates Cell Adhesion and Multidifferentiation in Mesenchymal Stem Cells on an Up-Conversion Substrate.doi.org/10.1021/acs.nanolett.1c04534
3.A novel near-infrared xanthene-based fluorescent probe for detection of thiophenpl in vitro and in vivo.doi:10.1039 /d0nj03370g
4.A near-infrared phosphorescent iridium(Ⅲ)complex for fast and time-resolved detection of cysteine and homocystenine. doi:10.1039/C8AN01107A
5.A Near-Infrared Xanthene Fluorescence Probe for Monitoring Peroxynitrite in Living Cells and Mouse Inflammation Model.doi:10.1039/C8AN01107A
6.Development of near-infrared xanthene fluorescence probe for the hinghly selective and sentive detection of cysteine. doi:10.1016/j.dyepig.2019.107563
7.A time-resolved near-infrared phosphorescent iridium(Ⅲ) complex for fast anf highly specific peroxynitrite detection and bioimaging applications.doi:10.1039/c9tb01673b
8.pH-responsive delivery of H2 through ammonia borane-loaded mesoporous silica nanoparticles improves recovery after spinal cord injury by moderating oxidative stress and regulating microglial polarization.Regenerative Biomaterials,doi.org/10.1093/rb/rbab058
轉(zhuǎn)載：江西立康 公眾號(hào) 鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/GjeDtwM_ov7IIq_ufDU9ag
